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SgPfu PCR Mix(含蓝色染料)图片
产品货号:
GS0145
中文名称:
SgPfu PCR Mix(含蓝色染料)
英文名称:
2×SgPfu PCR MasterMix(with Blue Dye)
产品规格:
20次|100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价

本制品可用于普通PCR、RT-PCR、RAPD、PCR测序、RACE、DD-PCR以及其它PCR相关的实验室工作。2×SgPfu PCR Mix包括3mM MgCl2、0.2mM dNTP、0.1U/μL Pfu DNA Polymerase和2×PCR buffer。经过优化的2×SgPfu PCR Mix使大多数PCR反应都能很好的进行。PCR反应混合物的配制可在几分钟之内完成,只需加引物、模板DNA和适量的去离子水。


影响PCR反应的因素很多,即使使用经高度优化的2×SgPfu PCR Mix也会遇到问题。如果发现PCR反应没有得所需产物或条带较弱,建议用试剂盒中提供的25mM MgCl2调节反应体系中的Mg2+浓度,以期获得更好的结果。




组分20次100次
2×SgPfu PCR Mix(含蓝色染料)500μL5×500μL
Sterilized ddH2O1mL5×1mL
MgCl2 (25mM)500μL1mL

保存:-20℃


  • 模板DNA准备:基因组DNA,反应体系中模板浓度推荐范围1~10μg/mL;质粒或噬菌体DNA浓度0.1~1ng/mL。
  • 引物准备:引物浓度推荐范围0.05~1μM。
  • 在无菌洁净的PCR管中依次加入以下溶液:
    成分用量
    Sterilized ddH2O20μL
    2×SgPfu PCR Mix25μL
    DNA模板1μL
    上游引物(10μM)2μL
    下游引物(10μM)2μL
    终体积50μL
  • 充分混匀后短暂离心。
  • 加适量的矿物油,反应管置于PCR仪中进行反应。
    • 对于有热盖的PCR仪可不加。



问题分析
产量低或无PCR产物模板质量差或产量低:模板完整性差;模板纯度差;模板数量少。
引物设计不完善。
PCR条件未优化:退火温度;延伸时间及温度;循环数。
反应条件未优化:Pfu DNA Polymerase用量不够;引物数量不够;
Mg2+浓度不够;反应混合物中使用dUTP或修饰的核苷酸。
模板复杂:高GC含量;长模板。
非特异性PCR产物引物设计不完善。
配制反应混合物温度不合适。
反应条件未优化:Mg2+浓度过高;模板用量过多。
PCR条件未优化:退火温度;加DMSO等。

相关搜索:SgPfu PCR Mix(含蓝色染料)PCR MixPCR预混液PCR预混反应液2×SgPfu PCR MasterMix(with Blue Dye)
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